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外泌体的表征方法之光学方法：目前，光学方法是外泌体表征的主要方法，即动态光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和纳米粒子跟踪分析(NTA)。这些方法允许对尺寸（DLS0.5–200nm；MALS10–500nm；NTA10–1000nm）、尺寸分布和浓度进行高分辨率测量。DLS和MALS的结合增加了测量范围(0.5–500nm)和精度。光学方法比较受欢迎的，但缺点是灵敏度低、试剂消耗高以及需要昂贵的设备。在使用纳米粒子跟踪分析NTA方法过程中，荧光染料的加入也提高了分辨率，并允许通过使用荧光标记来表征表面免疫表型。从而确定标记物存在。不同来源的外泌体可能需要采用不同的离心参数和分离方法。青岛血浆外泌体分离哪家好

差速离心法分离外泌体的实验原理：离心管内粒子的速度，由三种力（离心力、阿基米德浮力和斯托克斯粘性阻力）的平衡决定，如：其中geff为离心力（加速度），R为旋转半径，即粒子距旋转轴的距离，ω为旋转角频率，d为粒子直径，ρ为质量粒子的密度和ρsolv和η分别是介质的密度和粘度。在固定的离心条件（转速和介质成分）下，粒子速度完全由粒子的形态和密度决定。密度高于介质密度的粒子沿离心力“向下”运动，而比介质轻的粒子沿与离心力相反的方向“上浮”。对于相似的密度，较大的粒子迁移得更快。因此，在生物学中，离心主要用于按大小（差速和速率区带离心）或按密度（等密度离心）分离不同的物体。在这项研究中，我们专注于使用差速离心按大小进行颗粒分级。苏州上清外泌体供货商外泌体的分离方法可能还存在一定的局限性和偏差。

外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡，普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等体液中，具有细胞信使功能，参与细胞通讯。外泌体是目前为止定义较为明确的细胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs)，其生成过程、释放途径、大小及功能区别于微囊泡(Microvesicles)和凋亡小体(Apoptosisbodies)。外泌体是内吞起源的小(40–100nm)囊泡群。外泌体和脱落的囊泡都含有特定的蛋白质组、RNA和,dsDNA等。不同的细胞外环境富含不同类型的细胞外囊泡。即使由相同的细胞类型形成，不同类别的囊泡也具有不同的核酸特征。分离外泌体的方法：细胞碎片、凋亡体、外泌体和其他EV一起存在于生物体液中，具有密度、形状、大小和表面蛋白等物理性质的外泌体是分离机制的基础。结合两种或多种分离方法有助于有效地将外泌体与其他干扰成分分离。

外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。二是微流控分离法，该方法通过负压及震荡等机械原理分离外泌体，产量纯度均具有较大幅度提高，但需要特定设备配合。外泌体分离方法之纳米粒径分析法：确定性横向位移依赖于颗粒流动路径的变化，而颗粒流动路径取决于颗粒尺寸。这种方法虽然比较简单，但是需要使用扫描电镜技术、动态光散射技术、纳米粒子跟踪分析技术、单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术等。对于外泌体大小、形态、外泌体的浓度、zeta电位等分析也可以使用粒度分析仪。外泌体通过它们携带的间质基质组分，在宿主细胞中诱导上皮间质转化等重要的生物学反应。

外泌体的表征方法：根据药物递送系统(DDS)表征外泌体结构至关重要，因为它决定了DDS的特性，例如细胞或组织亲和力、应激反应、吸收途径和药物释放。2014年和2018年国际细胞外囊泡学会(MISEV2018)提出了外泌体（包括研究和外泌体制备）应满足的基本要求指南。在开发基于外泌体的DDS时，必须考虑数量、大小、形态、膜组成和蛋白质（包括受体）等参数。这些参数表征所用的技术主要为光学、非光学和微流体技术。外泌体的表征方法之非光学方法：FTIR光谱和衰减全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌体质量量化和脂质和蛋白质含量的总体估计。使用TRPS，可以同时测量大小、浓度和zeta电位。由于扫描电子显微镜（SEM）、透射电子显微镜的成本较高，近些年来，一种新型的纳米粒度分析仪器在外泌体研究领域迅速发展，比如：粒度分析仪可以不只可以进行单颗粒检测，颗粒粒径检测还可以检测细胞外泌体的浓度、zeta电位、形态等进行多维度检测。外泌体可以传递生物分子，例如蛋白质、DNA、mRNA等，影响接收器细胞的表现型和生理活性。长春市肺泡外泌体分离

外泌体的定量检测和分析可作为疾病诊断和治着中的新型指标。青岛血浆外泌体分离哪家好

外泌体衍生物miRNA的重要应用：外泌体保护miRNA免于降解，使它们比游离miRNA更稳定，并能被特定受体细胞有效整合。因此，在外泌体携带的货物中，miRNA可以提供有关它们来源的细胞类型、靶标和细胞状态的身份信息。越来越多的证据表明，疙瘩细胞来源的外泌体已成为通过传递病miRNA促进疙瘩细胞增殖、侵袭、血管生成、远处转移和疙瘩微环境重塑的主要候选者。血管生成对于恶性疙瘩的生长和转移至关重要，因为新血管可以提供额外的氧气和营养物质，还可以清理废物。比如：病细胞释放外泌体exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促进增殖、血管生成和疙瘩转移。青岛血浆外泌体分离哪家好